目前用于治疗慢性疼痛的药物效果常常较低，且伴随明显的副作用，因此急需开发替代疗法。虽然已有研究关注多种与疼痛相关的可溶性介质，如神经递质、细胞因子、趋化因子和小肽，但对细胞外囊泡（EV）的研究相对较少。EV是由细胞释放到细胞外空间的异质囊泡，它们在细胞间运输分子物质，从而影响受体细胞的功能。

为研究小鼠血清源性sEV在疼痛调节中的短期和长期作用，本研究综合应用Apogee纳米流式仪进行sEV特征和来源蛋白质的多模态分析。我们将幼稚型对照组及神经损伤模型（SNI）的雄性供体小鼠sEV注射到naïve雄性受体小鼠鞘内，结果发现这些sEV能够短暂提高基础机械阈值。在探讨sEV的长期作用时，我们观察到在诱导疼痛模型前两周，受体小鼠单次预防性鞘内注射sEV能够加速弗氏完全佐剂（CFA）引发的炎症性疼痛恢复。

我们的探索性研究还使用细胞术分析脊髓和背根神经节的免疫细胞群，结果显示CFA注射14天后免疫细胞群发生了显著变化。流式细胞术证实，经过sEV处理的小鼠脊髓中CD206+巨噬细胞数量增加，总的来说，这些研究证明了sEV在减轻疼痛方面可能发挥多种机制。

此外，除了NTA技术，我们也运用Apogee纳米流式仪对sEV进行了详细表征。虽然没有采用建模算法将光散射强度换算为标准单位，但通过参考珠，估算了相对光散射强度。检测到的囊泡光散射强度范围为≥83nm至480nm聚苯乙烯珠或1300nm硅珠，大多数囊泡在83-110nm范围内被检测到。

剂量反应研究显示，低剂量（1µg）sEV未能显著改变基础机械疼痛阈值，但高剂量（10µg）却意外地提高了这一阈值。具体而言，来自雄性naïve或SNI供体鼠的10µg sEV在注射后3小时和1天均显著提升了雄性受体小鼠的基础机械阈值。然而，10µg sEV未能改变热敏感。同时，我们还观察到鞘内注射naïve雄性供体小鼠的sEV导致受体小鼠后爪基础重量分布发生变化。

在我们对雄性naïve对照组和SNI模型小鼠的进一步研究中，发现sEV可以在SNI手术前两周注射以调节受体小鼠的疼痛。与PBS对照组相比，naïve小鼠的10µg sEV在SNI手术后1天有效提高了机械阈值，而SNI模型供体的sEV在术后3天同样提高了受体小鼠的机械阈值。

虽然sEV预处理未能阻止SNI模型中的机械超敏反应发展，但两种来源的sEV在初始阶段都略微延缓了这一超敏反应的发展。对于热敏感的测试，结果显示不同组之间并无显著差异。

结论是，研究表明，通过鞘内给药的小鼠血清中的sEV可以在naïve受体小鼠中诱导短期的机械性抗疼痛，而这一效果被纳曲酮所阻断。亮氨酸脑啡肽（leu-enkephalin）作为sEV的载体，提示短暂的机械性抗痛信号可能由阿片信号介导。sEV的存在能够帮助减轻受体小鼠的炎症性疼痛。

本研究突显了必要的多层面检测来了解免疫细胞的变化，强调不同组织的消化和控制策略可能导致不同的结果。同时，这些发现为未来研究免疫细胞亚型敲除小鼠提供了基础，以验证它们在sEV介导的炎症性疼痛缓解中的作用。不同性的sEV中的免疫标记可能赋予其特定的免疫调节功能，这潜在地模仿其来源细胞的生物学特性。

最后，我们不能排除来自于供体sEV或sEV内源性诱导的阿片信号差异对炎症性疼痛背景下免疫细胞群体可能产生的持久影响。因此，在丰富的科学研究基础上，品牌尊龙凯时致力于推动这一领域的发展。